項目名稱：長白山林蛙高效養殖及利用關鍵技術體系研究與示范

項目負責人：張士俊

項目完成人：張士俊 鄒建軍 崔鐵花 勾天兵 高　波 姚旭東 胡長群 王　麗

獎勵名稱：吉林省科技進步獎

獎勵等級：三等

獎勵時間：2017年11月

項目簡介：

    長白山林蛙（又名東北林蛙Rana dybowskii ）是一種食、藥兩用的珍貴蛙種，其雌性成蛙的輸卵管具有較高的營養藥用價值，自古在民間就被譽為與東北三寶齊名的傳世滋補佳品。經過幾十年的發展，林蛙養殖業已成為東北林區新的經濟增長點。現行的“半人工封溝生態養殖技術”雖然能初步滿足養蛙生產需要，但是一些影響林蛙養殖經濟效益的關鍵技術一直沒有突破性進展，致使養殖業處于低效益水平徘徊。而林蛙油產品服用不方便、保存期短、缺少科學的質量鑒別檢測手段也影響了下游產品需求，高附加值產品轉化率低，沒有對養殖業起到應有的拉動作用。為了提高林蛙養殖效益，開發新型產品，提供科學的質量檢測方法，為林蛙產業發展提供技術支撐，由吉林省林業科學研究院等單位承擔完成的“長白山林蛙高效養殖及利用關鍵技術研究與示范”（201204614）項目，經過四年的研究取得了重要成果。

    通過在蝌蚪飼養期影響蝌蚪性別的關鍵時段采用相應的降溫方法控制水溫，雌蛙比例可提高25.9%，有效提高了養殖經濟效益；通過采用人工放送變態期蝌蚪和人工輔助喂養等措施提高了林地利用率，降低了幼蛙入林階段的損失，有助于提高林蛙產量；通過病害防治研究，總結出各生產期主要病害的防治措施，通過預防有效降低了病害隱患，避免因病害導致大規模死亡情況的發生；通過林蛙越冬研究，得出了林蛙瀕臨死亡的水中溶解氧臨界值，并提出了水體增氧補救措施，總結出不同越冬方式的越冬管理方法，解決了林蛙如何安全越冬的問題。

    采用真空冷凍干燥技術對凍結參數的設定進行了研究，將原料油進行預冷凍、升華干燥、解析干燥、震蕩過篩、成型等工序開發了林蛙油片和林蛙油固體膏兩個產品，對產品進行了成分分析和穩定性實驗，其營養成分與原料油無明顯差別，在低溫、避光、陰涼干燥處保存穩定性較好，常溫下保存3年，產品蛋白質含量、酸度和過氧化值無明顯改變。

    林蛙指紋圖譜建立與應用采集13種蛙的樣本，使用血細胞基因組提取試劑盒提取樣本中所包含的基因組，篩選RAPD引物并進行差異條帶分析，引物S131能擴增出長度為1600bp的特異性條帶，可以作為長白山林蛙與其他樣本的基因靶點進行開發，同時引物S131能作為長白山林蛙與其他樣本的鑒別引物使用。通過特定基因測序及序列分析，不同種之間的18S rRNA序列上有差異，可以作為測序后種屬鑒定的依據。將篩選得到的差異性條帶進行序列測定，確定長白山林蛙鑒別的靶點，建立了基于PCR的林蛙鑒別方法，為林蛙質量標準檢測提供了依據。